Рут Киллиус родилась в 1968 году в Ларе (Германия). Заниматься музыкой начала в возрасте 4 лет, искусству игры на альте обучалась под руководством Ульриха Коха и Ким Кашкашьян. В 1993–1996 гг. была концертмейстером группы альтов оркестра Camerata Bern. Затем начала сольную карьеру, выступает с симфоническими оркестрами Бостона, Базеля, Оденсе, Ставангера, Мельбурна, Перта, Сиднея, Сингапура, Венским филармоническим и Будапештским фестивальным оркестрами, Симфоническим оркестром Центрального радио Германии (MDR, Лейпциг), камерными оркестрами Вены, Базеля, Сент-Пола, коллективами «Северная Симфония» (Ньюкасл, Великобритания), Camerata Salzburg и многими другими.
Регулярно выступает в дуэте с мужем, всемирно известным скрипачом и дирижером Томасом Цетмайром. В 1994 году Цетмайр и Киллиус основали «Цетмайр-квартет», в составе которого до сих пор постоянно гастролируют. Записи квартета высоко оценены международной критикой, диск с сочинениями Бартока и Хиндемита удостоен приза Diapason d’Or, а альбом с квартетами Шумана был отмечен журналом «Граммофон» как лучшая запись года.
Рут Киллиус регулярно выступает на фестивалях в Люцерне, Шлезвиг-Гольштейне, Эдинбурге, Хельсинки, Зальцбурге как солистка и ансамблистка. В ее репертуаре, наряду с сочинениями классиков и романтиков, множество произведений современных композиторов. Среди мировых премьер, исполненных с участием Рут Киллиус, Струнное трио Брайана Фернихоу, Квартет для гобоя, скрипки, альта и виолончели Эллиота Картера, двойные концерты для скрипки и альта с оркестром Хайнца Холлигера, Джона Каскена и многие другие.
Среди записей альтистки – альбом сочинений Эллиота Картера и Исан Юна (с гобоистом Хайнцем Холлигером и виолончелистом Томасом Деменгой); Концертная симфония Моцарта с «Оркестром XVIII века» под управлением Франса Брюггена; альбом Manto and Madrigals (дуэты для скрипки и альта композиторов ХХ века с Томасом Цетмайром); струнные трио Хиндемита, Петрасси, Вереша в составе ансамбля Trio Contrechamps; струнные квартеты Бетховена, Брукнера, Хартмана, Холлигера.
В числе ангажементов сезона 2020/21 – дебют с Российским национальным молодежным симфоническим оркестром, концерты c Софийским филармоническим оркестром, коллективами Musikkollegium (Винтертур) и «Королевская Северная Симфония», а также гастроли с «Цетмайр-квартетом» в Нидерландах, Германии и Великобритании.
С 2001 по 2003 гг. Рут Киллиус была профессором по классу альта в Университете Иоганна Гутенберга в Майнце.